HPLC(高效液相色譜)和UHPLC(超高效液相色譜)系統及其模塊組成在結構和功能上具有一定的相似性和差異性。以下是關于HPLC和UHPLC系統及模塊組成的詳細闡述:
### 一、HPLC系統組成
HPLC系統一般由以下幾個關鍵模塊組成:
1. **輸液系統**:
* **輸液泵**:是HPLC系統中最重要的部件之一,負責將流動相以恒定流量和壓力輸送到色譜柱中。輸液泵按照輸出液恒定的因素分為恒壓泵和恒流泵,按工作方式分為氣動泵和機械泵兩大類。機械泵中又有螺旋傳動注射泵、單活塞往復泵、雙活塞往復泵和往復式隔膜泵等多種類型。
* **溶劑容器**:用于儲存流動相,通常包括多個溶劑瓶,以便進行梯度洗脫。
2. **進樣系統**:
* **進樣器**:負責將樣品引入色譜柱中。常見的進樣器有隔膜和停流進樣器、六通進樣閥和自動進樣器等。進樣裝置要求密封性好、死體積小、重復性好,保證中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。
3. **分離系統**:
* **色譜柱**:是HPLC系統的核心部件,負責將樣品中的各組分進行分離。色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成,內部填充有經過制備處理的色譜填料,通常是5\~10粒徑的球形顆粒。
* **保護柱**:用于保護色譜柱免受污染和堵塞,延長色譜柱的使用壽命。
* **柱溫箱**:用于控制色譜柱的溫度,以保持分離條件的穩定性。
4. **檢測系統**:
* **檢測器**:用于檢測從色譜柱中流出的樣品組分,并將其轉換為電信號進行記錄和分析。常見的檢測器有紫外-可見光檢測器(UV/VIS)、熒光檢測器、電化學檢測器等。
5. **數據處理系統**:
* **數據記錄及處理裝置**:用于記錄檢測器輸出的電信號,并將其轉換為色譜圖或數據報告,以便進行后續的數據分析和處理。
此外,HPLC系統還可根據需要配置梯度洗脫裝置、在線脫氣機、預柱等附加模塊。
### 二、UHPLC系統組成
UHPLC系統是在HPLC系統的基礎上發展起來的,具有更高的分離效率和更快的分析速度。其系統組成與HPLC系統類似,但存在一些關鍵差異:
1. **超高壓輸液系統**:
* UHPLC系統采用超高壓輸液泵,最高壓力可達150MPa以上,以應對更小的顆粒尺寸和更高的流速需求。
2. **窄直徑色譜柱**:
* UHPLC系統通常使用直徑更小的色譜柱(如1.8mm、2.1mm等),以提高分離效率和縮短分析時間。
3. **高效檢測器**:
* 為了匹配更高的分離效率,UHPLC系統通常配備更靈敏、更高效的檢測器,如二極管陣列檢測器(DAD)、質譜檢測器(MS)等。
4. **自動化控制系統**:
* UHPLC系統通常配備更先進的自動化控制系統,以實現更精確的控制和更高的分析通量。
綜上所述,HPLC和UHPLC系統在組成上具有一定的相似性,但UHPLC系統在輸液系統、色譜柱、檢測器和自動化控制系統等方面進行了優化和升級,以應對更高的分離效率和更快的分析速度需求。